Аутологичная сыворотка
Идея использования препаратов, полученных из крови, для лечения глаза
Идея использования препаратов, полученных из крови, в виде глазных капель для лечения заболеваний поверхности глаза была предложена несколько десятилетий назад. В 1975 году был разработан портативный глазной перфузионный насос, применявшийся для доставки аутологичной сыворотки или плазмы на поверхность глаза пациентов с химическими ожогами. Десять лет спустя впервые сообщили об использовании глазных капель из аутологичной сыворотки для лечения пациентов с сухостью глаза, связанной с синдромом Шёгрена.
По сей день наиболее распространённым препаратом крови для лечения сухого глаза остаётся аутологичная сыворотка. Сейчас начали производить и дополнительные продукты, такие как богатая тромбоцитами плазма, плазма, богатая факторами роста, и лизат тромбоцитов, а также сыворотка пуповинной крови.
Почему аутологичная сыворотка?
Аутологичная сыворотка имеет преимущество перед традиционными глазными средствами (такими как заменители слёзы): она служит не только заменителем слёзы для смазывания поверхности глаза, но и содержит ряд биохимических компонентов, что делает её наиболее близкой к нашей естественной слезе. Положительное влияние аутологичной сыворотки и препаратов крови на миграцию и жизнеспособность эпителиальных клеток роговицы хорошо задокументировано многочисленными лабораторными исследованиями, а затем и исследованиями на людях. В частности, эти продукты применялись для лечения целого ряда заболеваний внешней поверхности глаза, включая прежде всего сухость глаза, стойкий эпителиальный дефект, язву роговицы, химический ожог, рецидивирующие эрозии роговицы и недостаточность лимбальных стволовых клеток.
Как готовят аутологичную сыворотку?
Аутологичную сыворотку получают из собственной крови пациента, взятой из периферической вены. Было показано, что технические детали и параметры приготовления — включая время свёртывания крови, время центрифугирования и разведение — влияют на качество и свойства конечного продукта, и по сей день не существует общепринятого международного метода. Наиболее распространённая форма: у пациента берут от 50 до 100 мл крови в пробирки без антикоагулянта, чтобы произошло полное свёртывание, и пробирки оставляют при комнатной температуре на время от 15 минут до двух часов. Затем пробирки помещают в центрифугу с силой от 500 до 3000g, что в большинстве приборов составляет от 1500 до 6000 оборотов в минуту, на 15 минут для полного отделения сыворотки от твёрдых компонентов. После этого собирают прозрачную верхнюю жидкость (надосадочную жидкость) и в стерильных условиях разводят её в сбалансированном солевом растворе (BSS) до нужной концентрации (которая колеблется от 20% до 50%). Аутологичную сыворотку можно хранить в морозильной камере три месяца, а в холодильнике неделю. Поэтому желательно приготовить от 12 до 14 флаконов, чтобы пациент мог менять флакон каждую неделю в течение трёх месяцев. Важно держать флаконы вдали от источника света, чтобы предотвратить разрушение витамина A. Важно также сказать пациенту, что если флакон перестал выглядеть прозрачным, использовать его не следует.
Почему сыворотку разводят до 20–50%?
Причина, по которой сыворотку разводят до 20–50%, заключается в желании снизить концентрацию определённых факторов в сыворотке, способных препятствовать заживлению (таких как TGF-B). Кроме того, ряд исследований показал, что при разведении сыворотки до 20% получается раствор, очень похожий на нашу слезу. Тем не менее некоторые исследования показали, что отдельные пациенты могут лучше реагировать на более высокие концентрации аутологичной сыворотки.
Богатая тромбоцитами плазма
Тромбоциты — это клетки крови, необходимые для процесса заживления ран; они поставляют множество факторов роста и цитокинов, содержащихся в их α-гранулах, таких как PDGF, TGF-β и тромбоцитарный фактор IV. Препараты, полученные из тромбоцитов, широко применяются в регенеративной медицине, челюстно-лицевой хирургии и ортопедии для стимуляции и ускорения заживления тканей. В последнее время для лечения сухого глаза были предложены различные препараты (такие как богатая тромбоцитами плазма). Богатая тромбоцитами плазма (PRP) — это препарат аутологичной плазмы с концентрацией тромбоцитов выше базового уровня. Кровь пациента собирают в пробирки, содержащие 3.2% цитрата натрия в качестве антикоагулянта, а затем центрифугируют (10 минут при 1600 оборотах в минуту), получая тем самым три слоя: бедная тромбоцитами плазма сверху, богатая тромбоцитами плазма посередине, а внизу преимущественно белые и красные клетки крови. Собирают только слой богатой тромбоцитами плазмы и разделяют на флаконы по 10 мл, так что каждый флакон содержит от 3 до 4 мл жидкости. Подобно аутологичной сыворотке, используемый флакон следует хранить в холодильнике неделю, а остальные флаконы — в морозильной камере. Основные эффекты богатой тромбоцитами плазмы обусловлены PDGF, который является первым фактором роста, участвующим в заживлении раны, определяя увеличение числа восстановленных клеток, стимулируя ангиогенез, поддерживая развитие новых кровеносных сосудов и активируя макрофаги. Кроме того, EGF ускоряет пролиферацию эпителия роговицы.
Резюме об аутологичной сыворотке и богатой тромбоцитами плазме
Глазные капли, полученные из препаратов крови, представляют интересный вариант для лечения роговицы и заболеваний внешней поверхности глаза, включая сухость глаза, за счёт поставки смеси факторов роста и цитокинов и имитации функции естественной слезы. Клинические исследования на людях подчёркивают хороший профиль как по безопасности, так и по эффективности всех этих продуктов. Это лечение может стать отличным вариантом для пациентов, недостаточно реагирующих на другие методы лечения.
Есть вопрос о здоровье глаз? Нужно мнение специалиста?